莲必治sodiumbisulflte Andrographolide
【产品名称】莲必治
【英文名称】Andrographolidi Natrii Bisulfis（Sodium Bisulfite Andrographolide）
【化 学 名】亚硫酸氢钠穿心莲内酯
【C A S 号】
【来 源】为爵床科植物穿心莲Andrographis
paniculata(Burm.f.)Nees的地上部分提取穿心莲内酯与亚硫酸氢钠的加成反应产物。
【物理性质】本品为白色或类白色的粉末；无臭，味苦，略具引湿性。本品在水中易溶，在甲醇中溶解，在乙醇中略溶，在氯仿中微溶，在乙醚中几乎不溶。
【分子式及相对分子量】C20H28O4·NaHSO3=C20H29O7SNa，436
【结 构 式】
【规 格】95.0～105.0％。
【生产厂家】四川广汉市本草植化有限公司 张永 13909023532
【生产工艺】取穿心莲内酯100g, 加95%乙醇1500L加热溶解。取1mol/L的Na2so4 400ml, 加2%H2SO4
480ml混合，加水至800ml。将穿心莲内酯溶液倒入上步液中，摇匀，加热回流30’后，加2%H2SO4使PH6-7,
回收乙醇至无醇味，用等体积氯仿提取3次，分出水层，并蒸出水至小体积。加醇1000ml,
溶解并过滤，滤液减压回收醇至至干，真空干燥，得白色加成物。
【鉴
别】(1)取本品约10mg，加无水碳酸钠0.2g与浓过氧化氢溶液0.5ml，置水浴上蒸干，炽热至炭化，放冷，加水5ml，搅拌，滤过，滤液加稀盐酸使成酸性后，显硫酸盐的鉴别反应(附录Ⅳ)。
(2)本品显钠盐的火焰反应(附录Ⅳ)。
(3)取本品与亚硫酸氢钠穿心莲内酯对照品，分别加水制成每1ml含10mg的溶液，照薄层色谱法(附录Ⅵ
B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿－丙酮－乙醇－水(5：5：5：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％3，5－二硝基苯甲酸乙醇溶液与5％氢氧化钾乙醇溶液的等量混合液(临用前混合)，热风吹至斑点显色清晰。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。
【检 查】 澄清度 取本品0.1g，加水10ml溶解后，溶液应澄清。
易氧化物 取上述澄清度检查项下的溶液，加0.1mol/L碘液l滴，微黄色不得消褪。
干燥失重 取本品，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过5.0％(附录Ⅸ G)。
【含量测定】 对照品溶液的制备
精密称取在105℃干燥至恒重的亚硫酸氢钠穿心莲内酯对照品，加60％乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品约10mg，精密称定，置50ml量瓶中，加60％乙醇溶解并稀释至刻度，摇习，即得。
测定法
精密量取对照品溶液与供试品溶液各3.0ml，分别置25ml量瓶中，加60％乙醇约12ml，置20℃水浴中，精密加入2％3，5－二硝基苯甲酸乙醇溶液3ml，摇匀，再精密加入2％氢氧化钾溶液3ml，摇匀，放置20分钟，用60％乙醇稀释至刻度，摇匀，并同法作空白试验，照分光光度法(附录Ⅴ
B)，在540nm的波长处测定吸收度，计算，即得。
【药理药效】 亚硫酸氢钠穿心莲内酯在水溶液中分解为穿心莲内酯和亚硫酸氢钠，由穿心莲内酯发挥药理学作用。穿心莲内酯系穿心莲Andrographis paniculata(Burm
f)Nees.中分离出的二萜类化合物。其具有抗菌、消炎、抗病毒、退热、调剂免疫功能及抗肿瘤作用。
1 解热、抗菌
穿心莲内酯具有抑制和延缓肺炎双球菌和溶血性乙型链球菌所引起的体温升高的作用。对于伤寒、副伤寒菌苗所致发热的家兔或2，4-二硝基苯酚所致发热的大鼠有一定的解热作用，对同时感染肺炎双球菌和溶血性链球菌培养物所致发热家兔能延迟体温上升时间，减轻体温上升程度。
210例呼吸道感染患者随机分为莲必治治疗组(治疗组)和头孢唑啉加病毒唑常规治疗组(对照组)。治疗组110例,男58例,女52例;年龄18～70岁,平均43
5岁;病程4～49ｈ,平均31.9ｈ;上呼吸道感染50例,急性扁桃体炎19例,急性支气管炎21例,肺部感染10例。对照组100例,男55例,女45例;年龄18～69岁,平均41
9岁;病程5～50ｈ,平均32.1ｈ;上呼吸道感染46例,急性扁桃体炎24例,急性支气管炎23例,肺部感染7例。治疗组使用莲必治注射液(无锡山禾集团健宏药业有限公司,批号991008,规格100ｍｇ/支),每日750ｍｇ溶入5%葡萄糖注射液或氯化钠注射液250ｍｌ中静脉滴注,滴速为30～60滴/min。疗程3～7天。对照组使用常规剂量头孢唑啉钠加入生理盐水250ｍｌ中静脉滴注,病毒唑注射液按每天10ｍｇ/ｋｇ加入5%葡萄糖250ｍＬ中静脉滴注,均每日1次,疗程3～7天。治疗组110例,痊愈60例,有效44例,无效6例,总有效率94
5%;对照组100例,痊愈42例,有效41例,无效17例,总有效率83
0%。两组比较,治愈率及总有效率有显著性差异(χ2=4.12,Ｐ<0.05及χ2=8.24,Ｐ<0.05)治疗组优于对照组。
采用莲必治注射液(LBZ)治疗急性扁桃体炎,并与青霉素(PG)作临床疗效比较,结果表明,对急性渗出型扁桃体炎莲必治注射液的疗效优于青霉素,这与其有较强的抗病毒作用相一致;对急性化脓型扁桃体炎的疗效,青霉素优于莲必治注射液,这可能与急性化脓型扁桃体炎病例样本较小有关。因此作者认为,临床上确定为急性化脓型扁桃体炎患者,应首选青霉素,或青霉素与莲必治注射液联用,而确诊为急性渗出型扁桃体炎患者则应首选莲必治注射液[28]。
胡敏涛以莲必治注射液治疗急性细菌性痢疾38例,取得了较好的疗效,并以环丙沙星作对照进行了随机对照观察,现将结果报道如下。观察两组治疗前后症状、体征、实验室检查的变化。结果两组治愈率、好转率、总有效率经χ2分析有显著性差异(P<0.05)。观察表明莲必治注射液,莲必治与西药环丙沙星联用,治疗急性细菌性痢疾的总有效率为92.11%,明显优于单用环丙沙星组,且无明显毒副作用
。
2 抗炎
穿心莲内酯1g/kg灌服及莲必治注射液125～250mg/kg皮下或腹腔注射，对二甲苯、组织胺、醋酸等所致的小鼠皮肤或腹腔毛细血管通透性增高、大鼠蛋清性足肿及巴豆油性肉芽囊渗液均有显著抑制作用，显示其抗炎活性，切除双侧肾上腺后抗炎作用消失，说明其抗炎机制与肾上腺有关。
穿心莲内酯也能减少蛋白激酶C（PKC）激动剂佛波醇酯（PMA）所致的中性粒细胞粘附和活性氧积累。这可能是由于穿心莲内酯干扰PKC信号途径，阻止活性氧的产生，拮抗PMA、FMLP所致的中性粒细胞的粘附和迁移，而对Ca++内流没有作用所致。
3 抗病毒
含0.5%精制穿心莲内酯的病毒净滴眼液对单纯疱疹病毒I型、腺病毒7型有灭活作用。
4 抗肿瘤
孙振化等研究表明，莲必治注射液（LBZ）在体外研究与动物实验均对胃癌、肝癌、肺癌、乳癌等有确切抗癌作用。穿心莲内酯及其衍生物对人胃肿瘤细胞KATV-111具有抑制作用。莲必治并用生物、化学疗法对体内促瘤生长抑制有显著增强效应，用实体瘤型S180瘤小鼠模型实验表明，100mg/kg剂量的莲必治与5×108/0.2ml淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）组合用药，抑瘤率达92.12%(P<0.01)；能明显延长荷瘤鼠的生存时间，有明显保护胸腺、恢复脾损伤的作用，使荷瘤鼠脾、胸腺指数恢复正常水平。
对100例恶性肿瘤患者进行莲必治注射液临床治疗,并作系列免疫功能检测及生存质量的观察。病种包括食道癌、胃癌、贲门癌、鼻咽癌、恶性淋巴瘤、原发性肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、甲状腺癌;对照组40例均经病理检查确诊为恶性肿瘤,病种分布同治疗组。两组患者均在接受常规抗肿瘤治疗(化疗、放疗或手术)后出现轻至中度炎症表现,如发热、咽痛、咳嗽等。结果:莲必治注射液可以提高患者的免疫功能。其ＮｋｃＡ、ＴＬｃＴＲ明显上升,ＳＩＬ-2Ｒ明显下降,能显著改善患者临床症状,提高生活质量,可以明显减轻瘤负荷。与对照组相比,有显著性差异。结论:莲必治除临床研究表明,并用莲必治注射液治疗肿瘤灶未切除的68例患者,在有效控制炎症的基础上,按ＷＨＯ标准使完全缓解(ＣＲ)达8
82%,大部缓解(ＰＲ)达22 06%,治疗有效率达30 9%。与对照组有效率20%相比,有显著性差异(Ｐ<0
05)。本临床研究结果提示,应用莲必治注射液综合治疗恶性肿瘤患者,不仅能发挥普通抗生素的抗菌消炎作用,而且在提高机体免疫功能缩小部分瘤体、改善临床症状及体征、提高临床疗效等方面有确切作用。
5 免疫调节
穿心莲内酯通过刺激机体产生各种免疫活性物质而发挥作用，是一种具有非特异性免疫功能的免疫刺激剂。穿心莲内酯能使小鼠胸腺萎缩，外周血T淋巴细胞减少，能降低脾PFC数和血清中SRBC抗体效价及抑制迟发型变态反应，明显抑制静脉血中碳廓清率（P<0.05）。
莲必治注射液能提高豚鼠单核巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率（P<0.05）及提高人外周血中NK细胞杀伤K562细胞的活性（P0.05），促使LAK细胞的生长、增加细胞表型，延长LAK细胞的杀伤效应时间，还能诱导人外周血单核细胞产生IFN-α、IFN-γ、TNF-α，药理作用与rII2、IFN-α等细胞因子的生物效应有相似之处，且与之有协同作用。这些效应因子在体内与M、NK等细胞协同作用形成一个网络，从而提高机体的免疫功能。有关穿心莲内酯参与免疫调节、发生免疫效应等机理，有待进一步的研究。
6 对心血管系统的作用
6.1 抗心肌缺血
吴基良等发现穿心莲内酯能明显改善垂体后叶素所致的大鼠心电图ST段的偏移，降低心肌及血清中过氧化脂质如丙二醛水平，降低血清中乳酸脱氢酶及二羟丁酸脱氢酶的活性。对心肌缺血有保护作用。根据穿心莲内酯的电化学研究，穿心莲内酯分子中的α、β-不饱和双键和超氧自由基（O-2）发生亲核反应，清除O-2，防止脂质过氧化反应，这可能与抗心肌缺血有关。 6.2 抑制iNOS表达
体外实验表明，1-50mM的穿心莲内酯能抑制由脂多糖（LPS）所致的RAW
264.7细胞诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达（IC50为17.4±1.1mM）。从而下调NO的生物合成。当穿心莲内酯和LPS同时加入的时候有最大的抑制效果。穿心莲内酯抑制iNOS蛋白在RAW264.7细胞中表达的可能机理是：阻止iNOS蛋白的从头合成和通过影响iNOS的翻译后修饰机制降低iNOS的稳定性，以致降低iNOS的量。这种抑制作用可能与穿心莲内酯治疗内毒素休克的血液动力学有关。体内外实验表明，穿心莲内酯能修复LPS所致的大鼠主动脉对去氧肾上腺素收缩反应，并反转其主动脉血压。
7 保肝利胆作用
腹腔注射穿心莲内酯可使大鼠胆汁流量明显增加，其所泌胆汁的物理性质亦有所改变。穿心莲内酯还可对抗CCl4和t-BHP所致的肝毒的能力与水飞蓟素相似，而对抗半乳糖胺和乙酰氨基酚所致的肝毒的能力强于水飞蓟素。但是对半乳糖胺或乙酰氨基酚所致的不同种动物的肝中毒，穿心莲内酯的保护机制有很大差别。
【药代动力学】以35S标记的穿心莲内脂亚硫酸氢钠加成物给大鼠静脉注射后，血中浓度很快下降，可迅速透过血脑屏障出现于中枢神经系统各部位，在脊髓中含量最高；在各脏器的分布，于注射后2小时以肾脏蓄积程度为最高，注射后6小时则以直肠蓄积程度为最高，主要以原形从尿排出，生物半衰期为2小时。
【不良反应】1999年7月以来,
蔡卫平在运用莲必治过程中已发现20例急性肾功能衰竭病例,其中10例进行了肾穿刺活检，认为病人可能对莲必治有过敏,而并非莲必治有肾毒性。迄今为止,尚未见到单独用莲必治致急性肾衰的病例,均为合用时发生,合用药中除氨基糖苷类等有肾毒性药以外尚有喹喏酮类、林可、扑热息痛及氨卞青霉素等并不具有直接肾毒性的药,我们分析氨基糖苷类合用可能加重肾损害,而与上述其他药合用可能容易导致过敏。
【用法与用量】肌内注射，一次0.1～0.2g，一日2次。静脉滴注，一日0.4～0.75g，加于5％葡萄糖注射液或氯化钠注射液中滴注。
【临床药物应用】用于细菌性痢疾，肺炎，急性扁桃体炎。
【贮 藏】 密闭，在阴凉干燥处保存。
【有效期】二年。